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제목 [Thermo Fisher]Bigfoot Spectral Cell Sorter (FACS)

2023-04-10
분야 생명과학 분류 동영상
첨부파일 bigfoot-spectral-cell-sorter-brochure.pdf (1.95 MB)
내용

 

광범위한 분류 애플리케이션을 위해 세포 분류 전문가가 유연하게 설계했습니다.

Invitrogen Bigfoot Spectral Cell Sorter는 워크플로우에 맞게 분석 범위를 확장할 수 있도록 설계되었습니다. 최대 9개 레이저와 60개 검출기를 사용하여, 기존 실험을 기존 보상(conventional compensation)을 사용하여 이동하거나, 스펙트럼 분석으로 전환하여 더 많은 마커와 세포 집단을 분석할 수 있습니다. 생물학적 봉쇄(biocontainment) 및 에어로졸 관리 기능이 통합되어 작업자와 시료를 보호할 수 있습니다.

 

분류 속도가 초당 70,000개 이벤트를 초과하는 이 시스템은 96-웰 플레이트를 8초 이내에, 384-웰 플레이트를 11 초 이내에 분류할 수 있습니다. 개별 실험실을 위한 충분한 단순성과 핵심 시설을 위한 충분한 견고성을 갖춘 Bigfoot Spectral Cell Sorter는 형광 단백질로 표지된 세포 분류에서 심층적인 면역표현형분석, 유전체학, 세포 및 유전자 치료 연구 및 기타 고성능, 고처리량 애플리케이션에 이르기까지 모든 범위의 분류 실험을 마스터하는데 도움이 됩니다.

 

고성능 및 처리량

초당 70,000개가 넘는 이벤트를 처리하는 분류 속도와 100,000 eps 이상의 분석 속도를 지원하는 Bigfoot Spectral Cell Sorter는 매우 빠른 속도를 자랑합니다. 이 분류기는 6-way로 튜브에 분류, 4-way로 96-웰 플레이트에 분류, 8-way로 384-웰 플레이트로 분류 또는 일직선 아래로  1536-웰 플레이트에 분류할 수 있습니다. 또한, 사실상 18-way sorting 기능을 통해 연구자들이 하나의 시료 또는 여러 다른 시료에서 여러 집단을 분리할 수 있습니다. 대량 분류의 경우, InfiniSort 기능을 사용하여 여러 튜브 또는 플레이트 분류를 순서대로 수행할 수 있습니다.

 

Bigfoot Spectral Cell Sorter는 8초 이내에 96-웰 플레이트 및 11초 이내에 384-웰 플레이트 분류를 수행할 수 있습니다.

플레이트 분류는 빠르고 매우 정확합니다. TMB 기질의 비색 전환을 통해 droplet 침적을 육안으로 확인하는 방법과 함께 HRP 방법을 사용함으로써, 단일 droplet을 96-웰 PCR 플레이트와 384-웰 PCR 플레이트 모두에서 100% 타겟 정확도로 소량으로 분류할 수 있음을 보여주었습니다. 이 백서는 빠르고 정확한 분류를 위해 개발된 엔지니어링 혁신에 대해 설명합니다.

 

생물학적 봉쇄(biocontainment) 및 에어로졸 관리 기능 통합

Bigfoot Spectral Cell Sorter는 National Sanitation Foundation International Standard 49에 정의된 Class II Type A2 생물안전 작업대의 사용자 및 제품 보호 표준에 동등한 기능을 제공하는 생물학적 봉쇄(biocontainment)가 통합된 Class II 생물안전 작업대를 특징으로 합니다. 맞춤 설계된 작업대는 높은 파라미터 분류기 성능을 저하시키거나 워크플로우에 영향을 주지 않으면서 작업자와 시료를 에어로졸로부터 보호합니다. 별도의 에어로졸 관리 시스템은 세포 분류기의 ISAC 지침을 준수합니다.

통합형 생물안전 작업대 및 에어로졸 관리

노즐 및 시료/분류 영역에 쉽게 접근할 수 있으면서 조절식 새시 덕분에 격리가 유지되어 사용자를 지속적으로 보호할 수 있습니다. 전용 AMS(에어로졸 관리 시스템), HEPA 필터 및 소프트웨어는 오염 경고를 제공하고, 막힘이 감지된 경우 흐름을 증가시킵니다.

 

세심한 설계 덕분에 생물학적 봉쇄(biocontainment) 기능을 번거롭게 추가할 필요 없이 Bigfoot 기기와 사용자 워크플로우의 일부로 원활하게 통합하였습니다. 조절식 새시(sash)는 시료 영역이나 분류 노즐에 안전하게 접근할 수 있도록 손쉽게 올리거나 내릴 수 있습니다. 시료 영역에 있는 내부 컨트롤 패널은 작업자가 격리 필드의 내/외부로 접근할 필요가 없게 합니다. 작업대를 통해 흐르는 공기는 실험실로 배출되거나 선택적인 캐노피 연결을 통해 외부 배기 시스템을 통해 배출됩니다.

 

 

기존 보상(conventional compensation) 또는 스펙트럼 분석 선택 가능

모든 Bigfoot Spectral Cell Sorter 구성은 기존의 세포 분류기처럼 기능하여, 하나의 fluorophore(컬러)에서 다른 fluorophore의 검출기로의 스펙트럼 스필오버(spectral spillover)를 고려하는 보상(compensation)을 적용합니다. Sasquatch 소프트웨어는 high-color 실험을 위해 최대 60 x 60 compensation matrix(60개 검출기 모두 사용)를 구성하고 적용합니다. 이를 통해 프로토콜이나 분석 방법을 변경할 필요 없이 기존의 유세포분석 실험을 Bigfoot 기기로 쉽게 이동할 수 있습니다. 높은 처리량, 고성능, 사용이 쉬운 세포 분류와 함께 생물학적 봉쇄(biocontainment)가 결합된 이점을 제공합니다.

 

또한 대부분의 Bigfoot 구성에서는 스펙트럼 유세포 분석이 가능하며, 보상(compensation) 대신 분광 불혼화(spectral unmixing)를 사용해 다른 fluorophore의 신호를 해결할 수 있습니다. 실험에서 모든 fluorophore의 전체 스펙트럼 신호를 분석함으로써, 스펙트럼 분석은 동일한 실험에서 유사한 신호를 가진 fluorophore를 사용하는 것을 가능하게 하므로 분석 가능한 파라미터 수를 늘릴 수 있습니다. 이 기능은 심층 면역표현형분석, 바이오마커 선별검사 및 기타 응용 분야에 특히 유용합니다.

 

Bigfoot 스펙트럼 구성을 사용하면 동일한 분류기에서 기존 및 스펙트럼 실험 둘다를 실행할 수 있으며, 추가 파라미터가 필요한 경우 기존 방법에서 스펙트럼으로 실험을 변환할 수 있습니다.

 

 

스펙트럼 유세포 분석

스펙트럼 광학과 분석의 중요한 장점 중 하나는 단일 실험에서 검출될 수 있는 파라미터(fluorophore)의 수가 크게 증가한다는 것입니다. Bigfoot cell sorter는 최대 9개의 레이저와 60개의 검출기로 구성할 수 있어 광범위한 패널에서 세포 집단의 스펙트럼 분류와 분석을 지원합니다. 예를 들어, 아래 그림은 56 fluorophores에 대한 spectral signature graph를 보여주며, 각 fluorophore’s signature는 고유할 뿐 아니라 추가적인 fluorophore을 어디에 추가할 지를 보여 줍니다.

분광 불혼화(spectral unmixing) 및 분석의 두 번째 장점은 자가형광(autofluorescence)이 자체 spectral signature를 가진 또 다른 fluorophore처럼 취급될 수 있다는 점입니다. 종래의 유세포분석법에서와는 달리, 자가형광은 염료 옵션을 제한하지 않으며 실험의 필요에 따라 평가 또는 제거할 수 있습니다.